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基因表达载体的构建伯远生物
伯远生物是国家级专精特新小巨人企业农业农村部生物育种重点实验室牵头多项省部级重大专项公司科研技术人员500硕博占比40%以上是国内最大植物功能基因研究综合性平台15年技术沉淀每年完成功能基因研究数量50000长期服务课题组10000含清北、复旦、武大、华科等知名高校及所有农业类科研院所服务头部种业公司客户300余家涉及四十多个物种含水稻、玉米、小麦、马铃薯、大豆五大主粮以及禾本科高粱、甘蔗葫芦科黄瓜、西甜瓜茄科番茄、辣椒与十字花科等100多个品种的50多个性状含抗虫抗病、抗除草剂、品质提升、株型改良等各类仪器设备投资超1个亿高标准恒温繁育基地200亩案例展示案例展示案例一图 利用强启动子35S过表达转录因子LEC2和AtMYB23分别促使异常的胚和表皮毛形成Zhang, 2003。案例二图 在ptox突变体中过表达ptox基因使突变体表型恢复Sharma et al., 2019参考文献Sharma M, Kretschmer C, Lampe C, Stuttmann J, Klosgen RB, 2019. Targeting specificity of nuclear-encoded organelle proteins with a self-assembling split-fluorescent protein toolkit.J Cell Sci132.Zhang JZ, 2003. Overexpression analysis of plant transcription factors.Curr Opin Plant Biol6, 430-40.背景说明背景说明基因过表达技术是指将目的基因构建到组成型表达启动子、组织特异性启动子或目的基因自身的启动子下游转入植物后实现基因表达量升高的目的。在植物研究中对研究未知基因功能、调控已知功能基因的表达及互补突变体基因功能等构建相应的过表达载体都是最基本的实验步骤和必要方法。服务流程服务流程客户在线下单—订单/实验材料确认—CloneCAD实验设计—基因克隆或全基因合成—过表达载体构建—遗传转化—PCR鉴定阳性株系后两步可选服务内容及说明服务内容及说明我司原始过表达载体中含有CaMV35S或Ubiquitin组成型表达启动子或其他启动子来启动转录单元的转录载体上携带卡纳原核抗性和真核筛选标记可选潮霉素、Basta、G418或甘露糖进行筛选。我们可以针对您的目的基因序列设计引物后扩增预期片段连入原始载体骨架得到重组子后进行遗传转化实验从而使目的基因过表达。我司原始过表达载体/功能互补载体列表。可根据不同的需求选择不同的启动子及真核抗性的载体。适用场景1、进行基因功能的研究提高目标基因的表达水平2、可用于突变体的功能互补实验中查看互补后能否恢复突变的表型可按您的需求选择使用组成型表达强启动子或目的基因自身的启动子3、转基因应用例如植物生物反应器生产目标蛋白、抗体、疫苗构建植物体内代谢通路获得抗虫抗病转基因品种等。优势特点1、采用我司已被授权的国际PCT专利技术专利号US 10,144,936 B2来进行大片段组装2、载体资源丰富除了上述常用的CaMV35S、Ubi启动子外我司也提供G10-90、rbcS、Per、GluB-4、GluA-1等诱导型或特异性启动子的过表达载体构建服务也可个性化订制您有其它需求的过表达载体3、载体库中有多种真核筛选标记可选潮霉素、Basta、G418或甘露糖进行筛选的原始载体可供选择4、基于无缝组装系统对于单个、多个序列均可进行无缝组装5、载体均为双元载体可直接应用于后期单子叶和双子叶遗传转化6、可以与我司转基因服务、检测服务、蛋白服务等衔接整个实验可以畅通且快速地完成。
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